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小鼠細胞

小鼠骨髓淋巴母細胞;32D clone3: 恒遠生物致力于建設國內最大、種類最全的細胞與微生物標準制品資源庫，為大學、科研機構及生物醫藥研發企業提供高質量、可回溯、品控可靠的生物制品。主要包括原代細胞及通用細胞株、細胞培養周邊試劑、微生物標準品等產品的開發、生產、儲存和銷售。歡迎來電咨詢！

產品詳情相關產品

細胞名稱	32D clone3小鼠骨髓淋巴母細胞
細胞別稱	32D clone3
商品貨號	HYCC20119
種屬來源	小鼠
組織來源	骨髓
生長特性	半貼半懸
細胞形態	淋巴母細胞樣
細胞規格	1×10^6cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測	無
培養基	RPMI1640+10%FBS+1ng/mlIL3+1%Anti-Anti
培養條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
倍增時間	~24-30小時

常溫細胞收貨后處理方法
1. 收到細胞后，首先觀察培養瓶是否完好，若發現培養瓶有破裂，培養基外溢、渾濁等現象，請及時拍照并與我們聯系。
2. 用 75%酒精對培養瓶表面進行消毒處理，將培養瓶置于細胞培養箱中靜置培養 2~4 h，以恢復細胞狀態。
3. 靜置完成后，取出培養瓶，顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）前三天照片為重要售后依據。如發現細胞異常請及時與我們聯系，如果細胞簽收三天內未與我們聯系，則默認為收貨良好。
4. 若細胞密度超過 80%，則可以根據提供的細胞培養步驟進行傳代或凍存；若細胞密度未達到80%，收集瓶中完全培養基，留 6mL 培養基，放入細胞培養箱中繼續培養。

細胞培養操作
1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL完全培養基，培養過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
a) 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b) 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml完全培養基終止消化。
c) 輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。
d) 將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。

貼壁細胞傳代注意點：
l 一定要PBS洗一遍。
l 細胞多觀察幾次掌握時間，不要在細胞沒有基本脫落就終止消化然后吹打下來，這樣細胞更容易分化和死亡。
l 不要一直對細胞吹打
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a) 收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。
b) 根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度1×10^6~1×10^7/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c) 將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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